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本生分享Elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)的技巧及注意事項(xiàng)
更新時(shí)間:2025-09-12瀏覽:228次

  本生分享Elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)的技巧及注意事項(xiàng)

  以下是ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵技巧與注意事項(xiàng)總結(jié),本生結(jié)合操作規(guī)范與常見(jiàn)問(wèn)題解決方案:

  一、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備?

  試劑平衡?

  所有試劑需提前30分鐘室溫平衡(20-25℃),避免溫度差異導(dǎo)致反應(yīng)不均?。

  標(biāo)準(zhǔn)品溶解后需靜置10-30分鐘,避免渦旋震蕩導(dǎo)致蛋白變性?。

  移液器校準(zhǔn)?

  移液槍誤差需<2%,每年至少校準(zhǔn)一次,日常可用純水自查?。

  加樣時(shí)選擇量程的35%-100%范圍(如20μL用20-200μL槍)?。

  二、加樣操作技巧?

  加樣規(guī)范?

  槍頭懸空45°貼壁加樣,避免觸碰孔底或產(chǎn)生氣泡?。

  每孔加樣量誤差需<5%,復(fù)孔加樣時(shí)間差≤5分鐘?。

  順序控制?

  加樣順序需一致(如標(biāo)準(zhǔn)品→樣本→抗體),顯色時(shí)間需同步?。

  漏加樣本需記錄,不可補(bǔ)加(避免交叉污染)?。

  三、孵育與洗滌?

  孵育條件?

  37℃避光孵育(誤差±0.5℃),震蕩孵育可提高反應(yīng)效率?。

  封板膜需一次性使用,避免多次開(kāi)閉導(dǎo)致污染?。

  洗滌要點(diǎn)?

  手工洗板需垂直拍干,機(jī)器洗板需檢查沖洗頭是否堵塞?。

  洗滌次數(shù)≥3次(含0.05% Tween-20),每次30秒?。

  四、顯色與終止?

  顯色控制?

  TMB底物需全程避光,顯色時(shí)間20分鐘(最長(zhǎng)不超過(guò)30分鐘)?。

  顯色過(guò)強(qiáng)時(shí)需提前終止(最高標(biāo)準(zhǔn)品顯色達(dá)平臺(tái)期)?。

  終止反應(yīng)?

  終止液加入后5分鐘內(nèi)讀數(shù),避免信號(hào)衰減?。

  五、常見(jiàn)問(wèn)題處理?

  問(wèn)題? ?解決方案?

  高背景值 增加封閉時(shí)間(1-2小時(shí))或洗滌次數(shù)?

  標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)R2<0.98 檢查標(biāo)準(zhǔn)品稀釋是否充分混勻?

  顯色不均 檢查底物是否避光保存或酶標(biāo)抗體失效?

  注:不同品牌試劑盒參數(shù)可能差異較大,建議以實(shí)際說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。

  注:僅供科研使用,以上資料供參考,如需具體產(chǎn)品說(shuō)明請(qǐng)咨詢(xún)技術(shù)老師或品牌供應(yīng)商。

  ELISA試劑盒 移液器 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承:遵紀(jì)守法,嚴(yán)于律己,寬仁以待,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng),較大限度的滿(mǎn)足客戶(hù)的需求。與客戶(hù)的共贏,是我們的發(fā)展目標(biāo),本生,您信任的合作伙伴!本生試劑盒

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